Détermination ultrasensible des niveaux d’AMP cyclique (cAMP) dans les lysats cellulaires avec un protocole simplifié. Le système d’immunodosage d’AMP cyclique à 96 puits Thermo Scientific cAMP-Screen Direct est un immunodosage chimioluminescent compétitif formaté avec une flexibilité maximale
Sensibilité du dosage
60 femtomoles cAMP
Contenu et stockage
1 kit, stocker entre 2°C et 8°C
Méthode de détection
Chimiluminescence
Gamme de produits
cAMP-Screen Direct™
Famille de protéines
GPCR (récepteur couplé aux protéines G)
Marque
Applied Biosystems
Points forts
Haute sensibilité et plusieurs heures de temps de luminescence fixe
Ce dosage chimiluminescent est conçu pour fournir la plus haute sensibilité de tout dosage de cAMP disponible dans le commerce. Il est possible de détecter jusqu’à 60 femtomoles de cAMP. Le dosage possède une large plage dynamique, détectant de 0,06 à 6 000 picomoles de cAMP sans dilution d’échantillons ni manipulation comme l’acétylation. Ceci est particulièrement utile dans les essais cellulaires lors de la mesure de la stimulation et/ou de l’inhibition d’agonistes ou d’antagonistes couplés aux Gs ou Gi. La précision intra-dosage pour les échantillons en double est généralement inférieure ou égale à 5 %. Une fois que la formulation du substrat/de l’activateur atteint le signal de luminescence, la plaque peut être lue pendant des heures, avec peu ou pas de dégradation du signal. Ceci est utile dans les écrans où plusieurs plaques sont comparées les unes avec les autres. De plus, le dosage présente une réactivité croisée exceptionnellement faible avec d’autres nucléotides cycliques ou contenant de l’adénosine.
Pour les études d’activation des récepteurs
Le système AMPc-Screen est conçu pour la quantification de l’AMPc cellulaire pour les dosages fonctionnels de l’activation des récepteurs. Le dosage a été utilisé avec des lignées cellulaires établies pour les mesures fonctionnelles avec des récepteurs endogènes, des lignées cellulaires avec des récepteurs de ligand exogènes sur la surface cellulaire, les cultures cellulaires primaires et les tissus en réponse au traitement avec les ligands appropriés. En outre, il a été utilisé pour la caractérisation des récepteurs, l’identification des ligands des récepteurs orphelines et la caractérisation de nouveaux récepteurs chimériques. Le dosage peut être utilisé pour le criblage à haut débit pour les composés qui stimulent ou interfèrent avec ces voies de transduction de signaux.
Spécifications
Cible : AMP cyclique
Durée d’incubation du dosage : 1 heure
Sensibilité du dosage : 60 femtomoles cAMP
Méthode de détection : Chimiluminescence
À utiliser avec l’équipement : Lecteur de microplaques
Étiquette ou colorant : Phosphatase alcaline
Caractéristiques principales
Utilise un substrat CSPD™ chimiluminescent très sensible avec la séquence activatrice Sapphire-II™ qui est déclenchée par un conjugué enzymatique composé d’une liaison cAMP À la phosphatase alcaline (cAMP-AP)
La formulation de substrat/activateur chimiluminescent prêt à l’emploi génère une émission de lumière luminescente soutenue à partir de 30 minutes après l’ajout
Principalement utilisé dans le dépistage secondaire et la recherche préclinique, où la sensibilité et l’absence de faux positifs sont essentielles
Sensibilité la plus élevée de tout dosage de cAMP disponible dans le commerce
Plusieurs heures de lecture avec peu ou pas de dégradation du signal
Protocole simple avec cellules cultivées directement sur la plaque de dosage
Utile pour une large gamme d’études sur l’activation des récepteurs
