Le kit de détection de glutathion, à usage de recherche uniquement, est un test colorimétrique conçu pour la quantification et la détection du glutathion dans le sang total, le sérum, le plasma, les érythrocytes, l’urine, les lysats cellulaires et les échantillons de tissus.Ce kit complet prêt à l’emploi comprend une ou plusieurs plaques noires à 96 puits, un étalon de glutathion, un réactif de détection, un tampon de dosage et d’autres composants pour effectuer le dosage. Ce kit nécessite l’utilisation d’un lecteur de microplaques à 96 puits capable de lire les émissions fluorescentes à 510 nm, avec excitation à 390 nm.Caractéristiques de performance• Type de dosage : kit de détection par fluorescence• Types d’échantillons : sang total, sérum, plasma, érythrocytes, urine, lysats cellulaires et échantillons de tissus• Sensibilité : 45 nM• Plage de la courbe standard : 0,2–25 μM• Réactivité : indépendante de l’espèceContexteLe glutathion (GSH) est la concentration la plus élevée de thiol non protéique dans les cellules de mammifères et est présent à des concentrations de 0,5–10 mM. Le GSH joue un rôle clé dans de nombreux processus biologiques, notamment la synthèse des protéines et de l’ADN, le transport des acides aminés et la protection des cellules contre l’oxydation. Les niveaux cellulaires nocifs de peroxyde d’hydrogène sont limités par l’enzyme glutathion peroxydase (GP) en utilisant le GSH comme réducteur. Le dimère GSH oxydé, GSSG, est formé à partir de GSH et de peroxyde par réaction de la GP.Le puissant inducteur NF-kB, l’acétate de tétradécanoyl phorbol, augmente les niveaux de GSSG intracellulaires et les rapports GSSG/GSH, ce qui suggère que le GSSG joue un rôle important dans la cascade de signaux d’activation NF-kB. La glutathione S-transférase (GST) est un groupe important d’enzymes qui catalysent l’addition nucléophile de GSH aux électrophiles. Elles sont codées par 5 familles de gènes ; 4 codent la GST cytosolique et 1 code la forme microsomale de la GST.Principe du dosageLe kit de détection de glutathion par fluorescence est conçu pour mesurer quantitativement le glutathion (GSH) et le glutathion oxydé (GSSG) présents dans une variété d’échantillons. Ce kit est unique, car le glutathion libre et le glutathion oxydé sont détectés dans le même puits dans la plaque de microtitration. Aucune séparation ou lavage n’est nécessaire. Le glutathion total est la somme de GSSG plus GSH. Un étalon de GSH est fourni pour générer une courbe d’étalonnage pour le dosage et tous les échantillons doivent être lus à partir de la courbe d’étalonnage. Le kit utilise un réactif de détection non fluorescent exclusif qui se lie de façon covalente au groupe thiol libre sur GSH pour produire un produit hautement fluorescent. Après mélange de l’échantillon ou de l’étalon au réactif de détection et incubation à température ambiante pendant 15 minutes, le produit fluorescent est lu à 510 nm dans un lecteur de plaques fluorescentes avec excitation à 390 nm. Le glutathion libre, GSH, est lu en premier après 15 minutes, suivi par l’ajout d’un mélange de réaction qui convertit tout le glutathion oxydé (GSSG) en GSH libre. Celui-ci réagit ensuite avec le réactif de détection en excès pour obtenir le signal lié à la teneur totale en GSH. La concentration totale de GSH générée dans l’échantillon est calculée à partir du signal généré.
Caractéristiques techniques
| Marque | Invitrogen |
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| Réf. B-LABO | BL-RE-093428 |
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| Réf. fabricant | 15840903 |
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| Contenu et stockage | Une ou plusieurs plaques à 96 puits, étalon, autres réactifs et tampons spécifiques au dosage et fiche technique spécifique au lot.<br><br>Conserver à –20°C. |
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| Format du kit d’immunoessai | Kit de détection |
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| Type de produit | Kit de détection fluorescente de glutathion |
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| Type d’échantillon | autres liquides biologiques, plasma, Sérum |
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| À utiliser avec (équipement) | Lecteur de microplaques |
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| Identification génétique (Entrez) | Non génétique |
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| Symbole de gène(s) | Non génétique |
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| Quantité | 96 dosages |
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| Conditions d’expédition | Homologué pour des expéditions sur de la glace carbonique ou mouillée |
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| Kit cible nommé | Glutathion |
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