Le kit de détection de glutathion, à usage de recherche uniquement, est un test colorimétrique conçu pour la quantification et la détection du glutathion dans le sang total, le sérum, le plasma, les érythrocytes, l’urine, les lysats cellulaires et les échantillons de tissus.Ce kit complet prêt à l’emploi comprend une ou plusieurs plaques transparentes à 96 puits, un étalon de glutathion, un tampon de dosage et d’autres composants pour effectuer le dosage. Ce kit nécessite l’utilisation d’un lecteur de microplaques à 96 puits capable de lire l’absorption optique à 405-412 nm.Caractéristiques de performance• Type de dosage : kit de détection colorimétrique• Types d’échantillons : sang total, sérum, plasma, érythrocytes, urine, lysats cellulaires et échantillons de tissus• Sensibilité : 0,634 μM• Plage de la courbe d’étalon : 0,78–25 μM• Réactivité : indépendante de l’espèceContexteLe glutathion (GSH) est la concentration la plus élevée de thiol non protéique dans les cellules de mammifères et est présent à des concentrations de 0,5–10 mM. Le GSH joue un rôle clé dans de nombreux processus biologiques, notamment la synthèse des protéines et de l’ADN, le transport des acides aminés et la protection des cellules contre l’oxydation. Les niveaux cellulaires nocifs de peroxyde d’hydrogène sont limités par l’enzyme glutathion peroxydase (GP) en utilisant le GSH comme réducteur. Le dimère GSH oxydé, GSSG, est formé à partir de GSH et de peroxyde par la réaction de la GP. Le puissant inducteur NF-kB, l’acétate de tétradécanoyl phorbol, augmente les niveaux de GSSG intracellulaires et les rapports GSSG/GSH, ce qui suggère que le GSSG joue un rôle important dans la cascade de signaux d’activation NF-kB. La glutathione S-transférase (GST) est un groupe important d’enzymes qui catalysent l’addition nucléophile de GSH aux électrophiles. Elles sont codées par 5 familles de gènes ; 4 codent la GST cytosolique et 1 code la forme microsomale de la GST.Principe du dosageLe kit de détection colorimétrique de glutathion est conçu pour mesurer quantitativement le glutathion (GSH) et le glutathion oxydé (GSSG) présents dans une variété d’échantillons. Aucune séparation ou lavage n’est nécessaire. Un étalon de GSSG est fourni pour générer une courbe d’étalonnage pour le dosage et tous les échantillons doivent être lus à partir de la courbe d’étalonnage. Le kit utilise un substrat colorimétrique qui réagit avec le groupe thiol libre sur GSH pour produire un produit très coloré. Les réactifs fournis sont en solution qu’il suffit de diluer pour les utiliser dans le dosage. Le glutathion oxydé (GSSG) peut être déterminé en utilisant la 2-vinylpyridine (non fournie) pour bloquer toute GSH libre dans l’échantillon. Tous les échantillons qui n’ont pas été traités par la 2-vinylpyridine produiront des niveaux de GSH totaux. La concentration de GSH libre dans l’échantillon est calculée à partir de la différence entre le GSH total déterminé et le GSH généré à partir du glutathion oxydé pour les échantillons traités à la 2-vinylpyridine. La concentration de GSH peut être déterminée soit par une lecture finale de la couleur développée à 405 nm, soit par la mesure de la vitesse de développement de la couleur à 405 nm.
Caractéristiques techniques
| Marque | Invitrogen |
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| Réf. B-LABO | BL-RE-093429 |
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| Réf. fabricant | 15703159 |
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| Contenu et stockage | Une ou plusieurs plaques à 96 puits, étalon, autres réactifs et tampons spécifiques au dosage et fiche technique spécifique au lot.<br><br>Conserver à –20°C. |
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| Méthode de détection | Colorimétrique |
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| Format du kit d’immunoessai | Kit de détection |
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| Type de produit | Kit de détection colorimétrique de glutathion |
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| Type d’échantillon | autres liquides biologiques, plasma, Sérum |
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| À utiliser avec (équipement) | Lecteur de microplaques |
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| Identification génétique (Entrez) | Non génétique |
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| Symbole de gène(s) | Non génétique |
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| Quantité | 4 x 96 tests |
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| Conditions d’expédition | Homologué pour des expéditions sur de la glace carbonique ou mouillée |
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| Kit cible nommé | Glutathion |
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