Le test ELISA InstantOne™ est spécialement conçu pour la mesure précise des ERK 1/2 phosphorylés (humain, souris, hamster), AKT 1/2/3 (humain, souris, hamster), et p70 S6K (humain, souris) dans les lysats cellulaires. La détection de ces molécules phosphorylées chez le rat est également attendue. Le kit ELISA InstantOne™ permet une analyse rapide des échantillons en une heure environ. Tous les réactifs utilisés dans un sandwich ELISA traditionnel sont ajoutés en solution à une plaque suivie d’une étape de lavage et d’une détection avec le substrat colorimétrique TMB.
La kinase régulée par signal extracellulaire (ERK) est le membre fondateur et un composant clé de la voie de la protéine kinase activée par des agents mitogènes (MAPK) classique. MEK active ERK1/2 par phosphorylation de ses motifs TxY en réponse à une variété de stimuli, y compris les facteurs de croissance et les cytokines. L’AKT, qui existe sous forme des isoformes multiples, est l’une des principales kinases activées par le phosphoinositide 3-kinase (PI3K). Ces deuxièmes messagers lipidiques se lient au domaine d’homologie à la pleckstrine de l’AKT pour favoriser sa translocation à la membrane plasmique en vue de son activation par phosphorylation à Thr308 et Ser473 par PDK1 et au complexe mTOR TORC2, respectivement. La phosphorylation sur ces deux sites est nécessaire pour une activation complète de l’activité Ser/Thr kinase de l’AKT. p70 S6 Kinase (p70S6K) est un membre de la famille ribosomique S6 des kinases Ser/Thr. L’activité de p70 S6K est contrôlée par plusieurs voies de signalisation, dont la MAPK, la phosphoïnositide-3 kinase (PI3K), et les voies mTOR. Cette régulation entraîne la phosphorylation de plusieurs sites de p70 S6K, y compris de Thr389 dans le domaine des liants, ce qui est nécessaire à une activation complète. Le p70 S6K activé phosphoryle plusieurs résidus sur la protéine ribosomique S6, ce qui entraîne une augmentation de la synthèse protéique.
Caractéristiques techniques
| Marque | Invitrogen |
| Réf. B-LABO | BL-RE-094922 |
| Réf. fabricant | 15590767 |
| Numéro d’adhésion | P23443,P27361,P28482,P31749,P31751,Q9Y243 |
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| Conjugué | Biotine |
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| Type de produit | Kit ELISA |
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| Type d’échantillon | Lysats cellulaires |
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| Espèces cibles | Humaine |
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| À utiliser avec (application) | ELISA |
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| À utiliser avec (équipement) | Lecteur de microplaques colorimétriques |
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| Identification génétique (Entrez) | 10000, 207, 208, 5594, 5595, 6198 |
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| Symbole de gène(s) | AKT,CWS6,PKB,PKB-ALPHA,PRKBA,RAC,RAC-ALPHA,ERK,ERK-2,ERK2,ERT1,MAPK2,P42MAPK,PRKM1,PRKM2,p38,p40,p41,p41mapk,p42-MAPK,PS6K,S6K,S6K-beta-1,S6K1,STK14A,p70 S6KA,p70(S6K)-alpha,p70-S6K,p70-alpha,ERK-1,ERK1,ERT2,HS44KDAP,HUMKER1A |
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| Contenus des kits | Anticorps de capture, Réactif pour anticorps de détection, Plaque d’analyse InstantOne™, Tampon de lyse cellulaire, Solution activatrice, Tampon de lavage (10x), Réactif de substrat (TMB), Solution d’arrêt, Lysat de cellules témoins positives (lyophilisé), Scellage des plaques |
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| Marqueur ou colorant | HRP |
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| Quantité | 96 Tests |
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| État réglementaire | RUO |
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| Volume d’échantillon | Lysat cellulaire (,20 μl) |
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| Conditions de stockage | 2°C à 8°C |
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| Cible | Humaine |
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| Heure du test | 1 h 20 min |
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| Durée totale du dosage | 1 h 10 min |
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