Clonez efficacement les produits de PCR générés avec n’importe quelle ADN polymérase thermostable à l’aide du kit de clonage PCR Thermo Scientific™ CloneJET™, un système doté d’une sélection positive.
Résistance aux antibiotiques des bactéries
Ampicilline (AmpR)
Méthode de clonage
Enzyme de restriction/MCS, PCR Blunt
Format
Kit
Type d’échantillon
Produits de PCR
À utiliser avec (application)
Clonage PCR
Marque
Thermo Scientific
Le kit de clonage par PCR CloneJET est un système perfectionné de sélection positive pour un clonage extrêmement efficace des produits de la PCR générés avec tout ADN polymérase thermostable. Tout autre fragment d’ADN à extrémités franches ou adhérentes peut être cloné. Il est idéal pour les fragments d’ADN phosphorylés ou non phosphorylés. La ligature dans le vecteur de sélection positive inclus ne prend que 5 minutes, et son rendement est de plus de 99 % de clones recombinants. Les produits PCR à extrémités franches générés avec une enzyme corrective sont ligaturés directement dans le vecteur de clonage.
Les produits PCR générés soit avec des ADN polymérases sans activité corrective soit avec des mélanges d’ADN polymérases sont débarrassés des extrémités avant la ligature en 5 minutes grâce à l’enzyme de coupe franche d’ADN, thermostable, fournie avec le kit. Toutes les souches de laboratoire courantes à base d’E. coli peuvent être transformées directement avec le produit de ligature.
De plus, tout autre fragment d’ADN aux extrémités tronquées ou cohésives peut être cloné. Ce kit convient parfaitement aux fragments d’ADN phosphorylés ou non phosphorylés. La ligature dans le vecteur à sélection positive inclus ne prend que 5 minutes et permet d’obtenir plus de 99 % de clones recombinants. Les produits issus de la PCR aux extrémités tronquées générés avec une enzyme de correction (par exemple, la polymérase
Pfu
Points forts
Recommandées dans les cas suivants
Clonage de produits issus de la PCR à extrémités franches ou à queue 3’-dA jusqu’à 10 kb ; Clonage de fragments d’ADN générés par des enzymes de restriction ; Séquençage d’ADN cloné ; Transcription In vitro et in vivo d’inserts clonés du promoteur T7
Remarque
Avant l’électroporation, purifiez sur colonne le mélange de ligature en utilisant, par exemple, le kit de purification par PCR GeneJET, †K0701, ou extrayez-le au chloroforme. L’électroporation est inhibée par la présence de protéines et de sels dans le mélange.
Caractéristiques principales
Rapide : clonage par PCR en 5 minutes seulement
Efficacité optimale : > 99 % de clones positifs
Pas de bruit de fond de clonage : vecteur à sélection positive
Polyvalent : convient parfaitement au clonage d’extrémités tronquées ou cohésives
