Offre une stratégie de clonage en une seule étape, en 5 minutes et très efficace (“clonage TOPO”’) pour l’insertion directe de produits PCR – l’amplification par polymérase Taq dans un vecteur plasmidique à des fins de sous-clonage
Souche bactérienne ou de levures
Non inclus
Résistance aux antibiotiques des bactéries
Ampicilline (AmpR), kanamycine (KanR)
Méthode de clonage
TOPO™-TA
Contenu et stockage
Boîte 1 : • Vecteur PCR activé par Topoisomerase I™2.1-TOPO™ • tampon PCR • solution saline • dNTPs • Modèle de contrôle • M13 amorces avant et arrière • Contrôle amorces pour PCR • Eau stérile
Stocker à -5 à -30°C. Tous les réactifs sont stables pendant 6 mois lorsqu'ils sont correctement stockés.
Format
Kit
Marque
Invitrogen
Chaque kit utilise le vecteur pCR™ 2.1-TOPOTA avec des sites de restriction pratiques pour le sous-clonage. Les kits de clonage sont disponibles dans une vaste gamme de cellules compétentes (disponibles séparément), ou sans cellules compétentes, selon vos besoins et votre budget. Résistant à la kanamycine (KanR) et à la Zeocin™ (ZeoR).pCR™ 2.1-TOPO ; vecteur TA : simplicité du clonage et du sous-clonageLe vecteur pCR 2.1-TOPO TA est linéarisé avec des saillies de 3’-thymidine (T) pour la ligature directe des produits PCR amplifiés par polymérase Taq (clonage TA) et est “activé” avec la topoisomérase I liée par covalence. Il n’est pas nécessaire d’ajouter la ligase et le clonage est terminé en 5 minutes. Les sites EcoRI flanquant le site d’insertion du produit PCR permettent une excision facile des inserts ou utilisent n’importe quelle combinaison de 15 sites de restriction pratiques flanquant votre insert PCR pour un sous-clonage directionnel facile.Sélection et manipulation des clones pCR 2.1-TOPO TALe vecteur TA pCR 2.1-TOPO contient à la fois des Marquages de résistance à l’ampicilline et à la kanamycine et le gène LacZα pour la sélection bleu/blanc.Clonage simplifié basé sur TOPOGrâce à la technologie de clonage TOPO, il n’est pas nécessaire d’utiliser des amorces pour PCR contenant des séquences spécifiques ou des procédures post-PCR, de préparer les vecteurs ni d’effectuer d’autres étapes de manipulation longues d’ADN. Il suffit d’ajouter votre réaction PCR directement dans le vecteur chargé en topoisomérase, d’incuber pendant 5 minutes et de la transformer les cellules compétentes E. coli.Clonage efficaceAvec jusqu’à 95 % de clones porteurs de l’insert désiré, vous n’avez plus besoin d’analyser autant de clones, ce qui vous permet de gagner du temps et de l’argent. Le vecteur TA pCR 2.1 polymérase-TOPO utilisé dans ce kit est livré avec des saillies de 3’- T pour une ligature efficace des produits PCR amplifiés par polymérase Taq, qui contiennent des saillies de 3’A.La norme du clonageEn matière de clonage, la technologie de clonage TOPO est un partenaire fiable pour des milliers de scientifiques depuis plus de dix ans. Rapide, simple à utiliser et efficace, le clonage TOPO a été appliqué à de nombreux vecteurs différents pour un large éventail d’applications.Kits de sous-clonage TOPO TA Cloning : options de kitLe kit de séquençage TOPO TA Cloning peut être acheté avec une variété de cellules compétentes offrant différents avantages selon vos besoins :
Deux versions du kit qui incluent un kit de minipréparation d’ADN plasmidique rapide PureLink™ (N° de catalogue K4500-02 et K4510-02) à utiliser pour l’isolement de plasmide recombinant propre et prêt pour le séquençage sont également disponibles.
Clonage, clonage par PCR
Points forts
Informations sur la commande
Conditions d’expédition : Glace carbonique
Caractéristiques principales
Clonage général : Cellules TOP10 (No de catalogue K4500-01, K4500-40)
Clonage haute efficacité : Cellules ™ TOP10 Electrocomp (No de catalogue K4560-01, K4560-40)
Clonage général, résistance aux bactériophages T1 : Cellules DH5α-T1R (No de catalogue K4520-01, K4520-40)
Croissance rapide : Mach1™ -T1R chimiquement compétente E. Coli (No de catalogue K4510-20)
Fournissez le vôtre : pour plus de souplesse et économiser de l’argent (No de catalogue de réf. 450641)
Rapide et simple : seulement trois étapes, réalisées en cinq minutes à peine, séparent le clonage de la PCR
Efficace : obtenez jusqu’à 95 % de clones avec le bon insert
Résultats prouvés : performances fiables pendant plus d’une décennie avec plus de 4 000 citations
Simple : aucune ligase, procédure post-PCR ou amorces pour PCR contenant des séquences spécifiques n’est requise
Vecteur : vecteur TA pCR 2.1-TOPO : vecteur de sous-clonage avec 15 sites de restriction pratiques qui flanquent votre insert pour un sous-clonage directionnel facile
Méthode de clonage : TOPO TA Cloning : topoisomérase I, ligature en 5 minutes des produits PCR avec des saillies 3′-A (amplification avec des polymérases Taq) sur le vecteur TOPO avec des saillies T
Cellules compétentes : plusieurs options, choisissez parmi les kits qui proposent des cellules compétentes (disponibles séparément) générales, à efficacité élevée, résistantes au bactériophage T1 ou à croissance rapide ; ou utilisez les vôtres
Caractéristiques techniques
Marque
Invitrogen
Réf. B-LABO
BL-RE-087189
Réf. fabricant
11543147
Souche bactérienne ou de levures
Non inclus
Résistance aux antibiotiques des bactéries
Ampicilline (AmpR), kanamycine (KanR)
Méthode de clonage
TOPO™-TA
Contenu et stockage
<b>Boîte 1 :</b><br>• Vecteur PCR activé par Topoisomerase I™2.1-TOPO™ <br>• tampon PCR <br>• solution saline<br>• dNTPs<br>• Modèle de contrôle<br>• M13 amorces avant et arrière<br>• Contrôle amorces pour PCR<br>• Eau stérile<br><br>Stocker à -5 à -30°C.<br>Tous les réactifs sont stables pendant 6 mois lorsqu'ils sont correctement stockés.
