Chaque kit utilise le vecteur pCR4Blunt-TOPO avec des sites d’amorce de séquençage spécifiquement conçus, qui permettent, pour chaque réaction, d’augmenter la séquence d’insert et de réduire celle du vecteur.
Souche bactérienne ou de levures
TOP10
Méthode de clonage
Blunt TOPO™
Contenu et stockage
Boîte 1 : • Vecteur PCR™ 4Blunt-TOPO™ activé par topoisomérase I • Solution saline • dNTPs • Modèle de contrôle • Amorce directes T3, T7, M13 et inverses M13 • Amorces de contrôle PCR • Eau stérile
Stockez entre -5 et -30°C. Tous les réactifs sont stables pendant 6 mois lorsqu’ils sont correctement stockés.
Encadré 2 : • Cellules d’E. coli chimiquement compétentes One Shot™ ou Electrocomp™ • Milieu S.O.C. • Plasmide de contrôle pUC19 superenroulé
Stockez entre -68 et -85°C.
Format
Kit
À utiliser avec (application)
Biologie de la chromatine
Marque
Invitrogen
Les kits incluent tout ce dont vous avez besoin pour cloner et sélectionner les vecteurs recombinants contenant le fragment de PCR de votre choix. Nous avons éliminé la majeure partie du site de clonage multiple du vecteur TOPO pCR4Blunt pour raccourcir la distance entre les sites d’amorce de séquençage et le site d’insertion à une valeur aussi faible que 33 bp. Résultat : les réactions de séquençage diminuent la séquence de vecteur et augmentent celle de l’insertion. Le vecteur TOPO pCR4Blunt comprend des sites pour quatre amorces de séquençage communes : M13 direct, M13 inverse, T7 et T3. Les kits incluent une aliquote de chaque.Sélection et manipulation de clones TOPO pCR4BluntLe vecteur TOPO pCR4Blunt contient à la fois des Marquages de résistance à l’ampicilline et à la kanamycine et une fusion de gènes LacZα-ccdB pour une sélection positive et une sélection bleu/blanc. Le site de clonage multiple minimisé du vecteur inclut toujours des sites EcoRI de flanquement pour l’excision simplifiée des produits de PCR clonés et un site Sse8387I unique pour la génération des suppressions imbriquées avant le séquençage. Les promoteurs T7 et T3 sont également présents pour la transcription in vitro.Clonage simplifié basé sur TOPOGrâce à la technologie de clonage TOPO, il n’est pas nécessaire d’utiliser des amorces pour PCR contenant des séquences spécifiques ou des procédures post-PCR, de préparer les vecteurs ni d’effectuer d’autres étapes de manipulation longues d’ADN. Il suffit d’ajouter votre réaction PCR directement dans le vecteur chargé en topoisomérase, d’incuber pendant 5 minutes et de la transformer avec les cellules compétentes E. coli fournies.Clonage efficaceAvec jusqu’à 95 % de clones porteurs de l’insert désiré, vous n’avez plus besoin d’analyser autant de clones, ce qui vous permet de gagner du temps et de l’argent. Le vecteur TOPO pCR4Blunt utilisé dans ce kit est livré sans saillies pour une ligature efficace des produits PCR créés par relecture, des polymérases thermostables qui laissent des produits PCR avec des extrémités franches.La norme en matière de clonageEn matière de clonage, la technologie de clonage TOPO est un partenaire fiable pour des milliers de scientifiques depuis plus de dix ans. Rapide, simple d’utilisation et efficace, le clonage TOPO a été appliqué à de nombreux vecteurs différents pour un large éventail d’applications. Kit de clonage par PCR Zero Blunt TOPO pour séquençage : options de kitLe kit de clonage par PCR Zero Blunt TOPO pour séquençage peut être acheté avec diverses cellules compétentes offrant différents avantages en fonction de vos besoins :
Biologie de la chromatine, immunoprécipitation de la chromatine (ChIP), clonage, analyse de la méthylation, clonage PCR, ARNi, recherche sur l’épigénétique et l’ARN non codant, séquençage de l’ADN traité par bisulfite
Caractéristiques principales
Clonage général : TOP10 (No de catalogue K2875-J10, K2875-20, K2875-40)
Clonage haute efficacité : Cellules ™ TOP10 Electrocomp (No de catalogue K2880-20, K2880-40)
Clonage général, résistance aux bactériophages T1 : DH5α-T1R (No de catalogue K2895-20)
Croissance rapide : Mach1™-T1R chimiquement compétente E. Coli (No de catalogue K2835-20)
Obtenez plus de séquences : permet d’augmenter la séquence d’insert et de réduire la séquence de vecteur lors de l’utilisation d’amorces de séquençage standard
Simplicité et rapidité : passez de la PCR aux clones en trois étapes en un temps de manipulation inférieur à 5 minutes
Efficacité : obtenez jusqu’à 95 % de clones avec le bon insert
Résultats prouvés : performances fiables pendant plus d’une décennie avec plus de 4 000 citations
VECTEUR : vecteur TOPO pCR4Blunt : Vecteur de clonage optimisé pour des résultats de séquençage améliorés
MÉTHODE DE CLONAGE : Clonage TOPO : Ligature en cinq minutes basée sur la topoisomérase des produits PCR amplifiés par la polymérase de relecture avec extrémités franches au vecteur
CELLULES COMPÉTENTES : Plusieurs options : faites votre choix parmi les kits qui proposent des cellules compétentes générales, à efficacité élevée, résistantes au bactériophage T1 ou à croissance rapide
Vecteur pCR4Blunt-TOPO : Optimisé pour le séquençage
Caractéristiques techniques
Marque
Invitrogen
Réf. B-LABO
BL-RE-087253
Réf. fabricant
10257382
Souche bactérienne ou de levures
TOP10
Méthode de clonage
Blunt TOPO™
Contenu et stockage
<b>Boîte 1 :</b><br>• Vecteur PCR™ 4Blunt-TOPO™ activé par topoisomérase I<br>• Solution saline<br>• dNTPs<br>• Modèle de contrôle<br>• Amorce directes T3, T7, M13 et inverses M13<br>• Amorces de contrôle PCR<br>• Eau stérile<br><br>Stockez entre -5 et -30°C.<br>Tous les réactifs sont stables pendant 6 mois lorsqu’ils sont correctement stockés.<br><br><b>Encadré 2 :</b><br>• Cellules d’<i>E. coli</i> chimiquement compétentes One Shot™ ou Electrocomp™<br>• Milieu S.O.C.<br>• Plasmide de contrôle pUC19 superenroulé<br><br>Stockez entre -68 et -85°C.
Format
Kit
À utiliser avec (application)
Biologie de la chromatine
Gamme de produits
One Shot™
Type de produit
Kits de clonage PCR
Accélérateur
T7, T3
Quantité
50 réactions
Vecteur
Vecteurs de clonage d’ADN Blunt
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