Chaque kit utilise le vecteur pCR4-TOPO TA avec des sites d’amorce de séquençage spécifiquement conçus, qui permettent, pour chaque réaction, d’augmenter la séquence d’insert et de réduire celle de vecteur. Selon vos besoins et votre budget, ces kits peuvent comporter tout un éventail de cellules compétentes, ou aucune de ces cellules. Ces kits incluent tout ce qui est nécessaire pour cloner et sélectionner des vecteurs recombinants contenant votre fragment de PCR de choix.
Points forts
Vector
vecteur PCR4-TOPO TA : vecteur de clonage optimisé pour des résultats de séquençage améliorés
Méthode de clonage
TOPO™ TA Cloning™: Topoisomérase I, ligature en 5 minutes des produits PCR avec saillies de 3’A (amplification
Taq
Cellules compétentes
Choix de kits : kits généraux, hautement efficaces, à cellules résistantes au T1 bactériophages, ou à cellules compétentes à fort taux de croissance, ou kits propres à vos applications
Optimisé pour le séquençage
Nous avons éliminé la majeure partie du site de clonage multiple du vecteur TA pCR4- TOPO pour raccourcir la distance entre les sites d’amorce de séquençage et le site d’insertion à une valeur aussi faible que 33 bp. Résultat : les réactions de séquençage diminuent la séquence de vecteur et augmentent celle de l’insertion. Le vecteur TA pCR4-TOPO comprend des sites pour 4 amorces de séquençage communes : M13 direct, M13 inverse, T7 et T3. Les kits incluent une aliquote de chaque.
Sélection et manipulation de clones TA PCR4-TOPO
Le vecteur TA pCR4-TOPO contient à la fois des marqueurs de résistance à l’ampicilline et à la kanamycine et une fusion de gènes
LacZα-ccdB
Clonage simplifié basé sur TOPO
Grâce à la technologie de clonage TOPO, il n’est pas nécessaire d’utiliser des amorces pour PCR contenant des séquences spécifiques ou des procédures post-PCR, de préparer les vecteurs ni d’effectuer d’autres étapes de manipulation longues d’ADN. Il suffit d’ajouter votre réaction PCR directement dans le vecteur chargé en topoisomérase, d’incuber pendant 5 minutes et de la transformer avec les cellules compétentes
E. coli
Clonage efficace
Avec jusqu’à 95 % de clones porteurs de l’insert désiré, vous n’avez plus besoin d’analyser autant de clones, ce qui vous permet de gagner du temps et de l’argent. Le vecteur pCR4-TOPO TA utilisé dans ce kit est livré avec des surpendus 3'T pour une ligature efficace
des produits PCR amplifiés par Taq, qui contiennent des surpendus 3'A.
Caractéristiques techniques
| Marque | Invitrogen |
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| Réf. B-LABO | BL-RE-087266 |
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| Réf. fabricant | 11583827 |
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| Résistance aux antibiotiques des bactéries | Ampicilline (AmpR), kanamycine (KanR) |
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| Méthode de clonage | TOPO™-TA |
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| Contenu et stockage | <b>Boîte 1 :</b><br>• Tampon™™<br>• PCR vecteur 4-TOPO activé par l'I-topoisomérase<br>• Solution saline<br>• dNTPs<br>• Modèle de contrôle<br>• T3, T7, M13 avant et amorces inversées M13<br>• amorces pour PCR de contrôle<br>• Eau stérile<br><br>Stockez à -5 à -30°C.<br>Tous les réactifs sont stables pendant 6 mois lorsqu'ils sont correctement stockés. |
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| Format | Kit |
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| Gamme de produits | TOPO™ |
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| Type de produit | Kit de clonage |
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| Accélérateur | T7, T3 |
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| Quantité | 10 réactions |
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| Conditions d’expédition | Glace carbonique |
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| Vecteur | Vecteurs TOPO-TA |
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