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Invitrogen™ TOPO™ TA Cloning™ Kit for Sequencing, with pCR™4-TOPO™ Vector, One Shot™ TOP10 Chemically Competent E. coli, and PureLink™ Quick Plasmid Miniprep Kit

Réf. : BL-RE-087317Réf. fabricant : 10587163
856,00 € HT

Offre une stratégie de clonage en 5 minutes et en une seule étape. Kit de séquençage Invitrogen™ TOPO™ TA Cloning™, avec vecteur pCR4-TOPO, cellules d’E. coli chimiquement compétentes TOP10 One Shot™ et kit de préparation plasmidique Purelink permet l’insertion directe de produits PCR amplifiés par polymérase Taq dans un vecteur plasmidique pour le séquençage.

Souche bactérienne ou de levures
TOP10
Type de cellule
Chimiquement compétent
Méthode de clonage
TOPO™-TA
Contenu et stockage
Boîte 1 :
• Vecteur pCR4-TOPO™ activé par topoisomérase I
• Tampon PCR
• Solution saline
• dNTPs
• Modèle de contrôle
• Amorces directes T3, T7, M13 et inversées M13
• amorces pour PCR de contrôle
• Eau stérile

Stockez de -5 à -30°C.
Tous les réactifs sont stables pendant 6 mois lorsqu’ils sont correctement stockés.

Encadré 2 :
•Cellules d’E. coli chimiquement compétentes One Shot™ ou Electrocomp™
• Milieu S.O.C.
• Plasmide de contrôle pUC19 superenroulé

Stockez de -68 à -85°C.

Boîte 3 :
kit de minipréparation à plasmide rapide Purelink (réf. K4575-02)

Stockez à température ambiante.
Format
Kit
Marque
Invitrogen

Les kits TOPO™ TA Cloning™ pour séquençage utilisent le vecteur TA pCR4-TOPO™ avec des sites d’amorce de séquençage spécifiquement conçus, qui permettent, pour chaque réaction, d’augmenter la séquence d’insert et de réduire celle du vecteur. Ces kits incluent tout ce dont vous avez besoin pour cloner et sélectionner les vecteurs recombinants contenant le fragment de PCR de votre choix.

Points forts

Présentation des kits TOPO™ TA Cloning™ pour le kit de séquençage

Vecteur TA pCR4-TOPO™ : optimisé pour le séquençageUne grande partie du site de clonage multiple du vecteur TA pCR4-TOPO™ a été supprimée pour raccourcir la distance entre les sites d’amorce de séquençage et le site d’insertion à seulement 33 bp. Résultat : les réactions de séquençage diminuent la séquence de vecteur et augmentent celle de l’insertion. Le vecteur TA pCR4-TOPO™ comprend des sites pour 4 amorces de séquençage communes : M13 direct, M13 inverse, T7 et T3. Les kits incluent une aliquote de chaque.

Sélection et manipulation des clones TA pCR4-TOPO™Le vecteur TA pCR4-TOPO™ contient à la fois des Marquages de résistance à l’ampicilline et à la kanamycine et une fusion de gènes LacZα-ccdB pour la sélection positive et le sélection bleu/blanc. Le site de clonage multiple minimisé du vecteur inclut toujours des sites EcoRI de flanquement pour l’excision simplifiée des produits de PCR clonés et un site Sse8387I unique pour la génération des suppressions imbriquées avant le séquençage. Les accélérateurs T7 et T3 sont également présents pour la transcription in vitro.

  • VECTEUR : vecteur TA pCR4-TOPO™ : vecteur de clonage optimisé pour améliorer les résultats de séquençage
  • MÉTHODE DE CLONAGE : Clonage TA TOPO™ : ligature en 5 minutes basée sur la topoisomérase I des produits PCR avec des saillies de 3´A (amplification Taq) sur le vecteur
  • CELLULES COMPÉTENTES : Plusieurs options : faites votre choix parmi les kits qui proposent des cellules compétentes générales, à efficacité élevée, résistantes au bactériophage T1 ou à croissance rapide

Caractéristiques principales

  • Augmentation des séquences : permet d’augmenter la séquence d’insert et de réduire la séquence de vecteur lors de l’utilisation d’amorces de séquençage standard
  • Simplicité et rapidité : passez de la PCR aux clones en 3 étapes en un temps opérateur inférieur à 5 minutes
  • Efficacité : obtenez jusqu’à 95 % de clones avec le bon insert
  • Éprouvé : performances fiables pendant plus d’une décennie avec plus de 4 000 citations

Caractéristiques techniques

MarqueInvitrogen
Réf. B-LABOBL-RE-087317
Réf. fabricant10587163
Souche bactérienne ou de levuresTOP10
Type de celluleChimiquement compétent
Méthode de clonageTOPO™-TA
Contenu et stockage<b>Boîte 1 :</b><br>• Vecteur pCR4-TOPO™ activé par topoisomérase I<br>• Tampon PCR <br>• Solution saline<br>• dNTPs<br>• Modèle de contrôle<br>• Amorces directes T3, T7, M13 et inversées M13<br>• amorces pour PCR de contrôle<br>• Eau stérile<br><br>Stockez de -5 à -30°C.<br>Tous les réactifs sont stables pendant 6 mois lorsqu’ils sont correctement stockés.<br><br><b>Encadré 2 :</b><br>•Cellules d’<i>E. coli</i> chimiquement compétentes One Shot™ ou Electrocomp™<br>• Milieu S.O.C.<br>• Plasmide de contrôle pUC19 superenroulé<br><br>Stockez de -68 à -85°C.<br><br><b>Boîte 3 :</b><br>kit de minipréparation à plasmide rapide Purelink (réf. K4575-02)<br><br>Stockez à température ambiante.
FormatKit
Gamme de produitsOne Shot™
Type de produitKit de clonage
AccélérateurT7, T3
VecteurVecteurs de clonage TOPO-TA
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