Le kit d’ADN de donneur Invitrogen TrueTag, GFP Stem, fournit une solution rapide pour le marquage à haute efficacité (jusqu’à 100 % de cellules modifiées) de gènes silencieux ou exprimés différemment avec de l’ADN de donneur prêt à la transfection.
À utiliser avec (application)
Imagerie cellulaire
Quantité
10 reactions
Marque
Invitrogen
Points forts
Chaque kit est conçu pour permettre aux utilisateurs de
Enrichir les cellules marquées même lorsque la protéine cible n’est pas exprimée
Choisir entre un marquage fluorescent de fusion ou co-exprimé
Choisir les marqueurs de sélection de la puromycine ou de la blasticidine : selon ce qui convient le mieux au modèle cellulaire
Éliminer facilement les marqueurs de résistance aux antibiotiques avec du Cre / Lox après l’enrichissement cellulaire
Le kit inclut les composants suivants
Quatre modèles de donneur linéaires : Résistance à la puromycine / C-terminale + 2A, résistance à la blasticidine / C-terminale + 2A, résistance à la puromycine / C-terminale, résistance à la blasticidine / C-terminale
Master Mix PCR haute fidélité Phusion Flash
Colonnes et tampons de purification par PCR
Amorces de contrôle positif pour marquer la protéine acide fibrillaire gliale humaine (GFAP)
Logiciel intuitif permettant de concevoir rapidement des réactifs spécifiques aux gènes
Les réactifs de modification de gènes spécifiques à la cible sont requis pour une bonne activation du marqueur fluorescent. Le logiciel Web Invitrogen TrueDesign Genome Editor effectue le travail de conception pour vous :
Identifier le transcript du gène cible
Désigner le site d’insertion
Concevoir et activer la commande facile de tous les composants nécessaires
Réactifs requis disponibles via le logiciel TrueDesign (non inclus dans le kit)
L’ARN guide CRISPR ou les TALEN conçus à côté de l’extrémité N ou C-terminale
Oligos pour PCR : amplifiez votre donneur et ajoutez les bras d’homologie appropriés
Amorces de séquençage pour l’évaluation de l’efficacité du clivage CRISPR-Cas9
Amorces de vérification pour valider l’insertion correcte du donneur d’ADN TrueTag
Également requis et disponibles à l’achat séparément ou dans le cadre du flux de travaux TrueDesign
Réactif de transfection CRISPRMAX ou réactif de transfection MessengerMAX
Caractéristiques principales
Une solution rapide pour le marquage à haute efficacité (jusqu’à 100 % de cellules modifiées) de gènes silencieux ou exprimés différemment avec de l’ADN de donneur prêt à la transfection
Le kit fournit tout le nécessaire pour produire un donneur d’ADN de haute qualité pour marquerle gène avec un marqueur de sélection et du Stem
Il suffit de fournir deux amorces spécifiques au locus pour ajouter des bras d’homologie et amplifier le donneur par PCR
Amplification par PCR en une étape pour générer un modèle de donneur : aucun clonage requis
Générer des donneurs d’ADN prêts à la transfection en quelques heures plutôt qu’en plusieurs jours
Économisez jusqu’à 3 mois avec des enrichissements comparés à l’isolement cellulaire unique et la caractérisation
Enrichir jusqu’à 100 % de cellules marquées au GFP Stem
Caractéristiques techniques
Marque
Invitrogen
Réf. B-LABO
BL-RE-087338
Réf. fabricant
17816511
À utiliser avec (application)
Imagerie cellulaire
Quantité
10 reactions
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