Offre une stratégie de clonage à étape unique très efficace, en 5 minutes (Clonage TOPO) pour l’insertion directe de produits de PCR à extrémité franche amplifiés par des polymérases – de correction d’épreuves dans un vecteur plasmidique pour le séquençage.
Souche bactérienne ou de levures
TOP10
Type de cellule
Chimiquement compétent
Méthode de clonage
Blunt TOPO™
Contenu et stockage
Vecteur TOPO™ pCR4-Blunt linéarisé et activé par topoisomérase I, solution saline, dNTPs, modèle de contrôle et amorces, amorces M13 directes et inverses, cellules d’E. coli chimiquement compétent TOP10 One Shot™, milieu S.O.C. et plasmide de contrôle superenroulé. Stockez les cellules d’E. coli One Shot™ à -80°C. Conserver tous les autres composants à -20°C. La stabilité de tous les réactifs est garantie pendant 6 mois, sous réserve d’une bonne conservation.
Format
Kit
Marque
Invitrogen
Chaque kit utilise le vecteur TOPO pCR4Blunt avec des sites d’amorce de séquençage spécifiquement conçus, qui permettent, pour chaque réaction, d’augmenter la séquence d’insert et de réduire celle du vecteur. Ces kits incluent tout ce dont vous avez besoin pour cloner et sélectionner les vecteurs recombinants contenant le fragment de PCR de votre choix.Vecteur TOPO pCR4Blunt : optimisé pour le séquençageNous avons éliminé la majeure partie du site de clonage multiple du vecteur TOPO pCR4Blunt pour raccourcir la distance entre les sites d’amorce de séquençage et le site d’insertion à une valeur aussi faible que 33 bp. Résultat : les réactions de séquençage diminuent la séquence de vecteur et augmentent celle de l’insertion. Le vecteur TOPO pCR4Blunt comprend des sites pour quatre amorces de séquençage communes : M13 direct, M13 inverse, T7 et T3. Les kits incluent une aliquote de chaque.Sélection et manipulation de clones TOPO pCR4BluntLe vecteur TOPO pCR4Blunt contient à la fois des Marquages de résistance à l’ampicilline et à la kanamycine et une fusion de gènes LacZα-ccdB pour une sélection positive et une sélection bleu/blanc. Le site de clonage multiple minimisé du vecteur inclut toujours des sites EcoRI de flanquement pour l’excision simplifiée des produits de PCR clonés et un site Sse8387I unique pour la génération des suppressions imbriquées avant le séquençage. Les promoteurs T7 et T3 sont également présents pour la transcription in vitro.Clonage simplifié basé sur TOPOGrâce à la technologie de clonage TOPO, il n’est pas nécessaire d’utiliser des amorces pour PCR contenant des séquences spécifiques ou des procédures post-PCR, de préparer les vecteurs ni d’effectuer d’autres étapes de manipulation longues d’ADN. Il suffit d’ajouter votre réaction PCR directement dans le vecteur chargé en topoisomérase, d’incuber pendant 5 minutes et de la transformer les cellules compétentes E. coli fournies.Clonage efficaceAvec jusqu’à 95 % de clones porteurs de l’insert désiré, vous n’avez plus besoin d’analyser autant de clones, ce qui vous permet de gagner du temps et de l’argent. Le vecteur TOPO pCR4Blunt utilisé dans ce kit est livré sans saillies pour une ligature efficace des produits PCR créés par relecture, des polymérases thermostables qui laissent des produits PCR avec des extrémités franches.La norme en matière de clonageEn matière de clonage, la technologie de clonage TOPO est un partenaire fiable pour des milliers de scientifiques depuis plus de dix ans. Rapide, simple d’utilisation et efficace, le clonage TOPO a été appliqué à de nombreux vecteurs différents pour un large éventail d’applications. Kit de clonage par PCR Zero Blunt TOPO pour séquençage : formats de kitLe kit de clonage par PCR TOPO Zero Blunt pour séquençage peut être acheté avec diverses cellules compétentes offrant différents avantages en fonction de vos besoins :
Biologie de la chromatine, immunoprécipitation de la chromatine (ChIP), clonage, analyse de la méthylation, clonage PCR, ARNi, recherche sur l’épigénétique et l’ARN non codant, séquençage de l’ADN traité par bisulfite
Points forts
Informations sur la commande
Conditions d’expédition : Glace carbonique
Caractéristiques principales
Clonage général : Cellules TOP10 (No de catalogue K2875-J10, K2875-20, K2875-40)
Clonage haute efficacité : Cellules ™ TOP10 Electrocomp (No de catalogue K2880-20, K2880-40)
Clonage général, résistance aux bactériophages T1 : DH5α-T1R (No de catalogue K2895-20)
Croissance rapide : Mach1™-T1R chimiquement compétente E. Coli (No de catalogue K2835-20)
Caractéristiques techniques
Marque
Invitrogen
Réf. B-LABO
BL-RE-087341
Réf. fabricant
10105092
Souche bactérienne ou de levures
TOP10
Type de cellule
Chimiquement compétent
Méthode de clonage
Blunt TOPO™
Contenu et stockage
Vecteur TOPO™ pCR4-Blunt linéarisé et activé par topoisomérase I, solution saline, dNTPs, modèle de contrôle et amorces, amorces M13 directes et inverses, cellules d’E. coli chimiquement compétent TOP10 One Shot™, milieu S.O.C. et plasmide de contrôle superenroulé. Stockez les cellules d’E. coli One Shot™ à -80°C. Conserver tous les autres composants à -20°C. La stabilité de tous les réactifs est garantie pendant 6 mois, sous réserve d’une bonne conservation.
Format
Kit
À utiliser avec (application)
Biologie de la chromatine
Gamme de produits
One Shot™
Type de produit
Kits de clonage PCR
Accélérateur
T7, T3
Quantité
10 réactions
Vecteur
Vecteurs de clonage d’ADN Blunt
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