Le kit de clonage EX de l’assemblage GeneArt Gibson permet l’assemblage d’ADN via une technique qui permet de lier de manière transparente jusqu’à 15 fragments d’ADN qui se chevauchent dans le cadre d’une réaction dans un seul tube et en deux étapes optimisée. Les fragments d’ADN de différentes longueurs sont assemblés uniformément à l’aide de chevauchements complémentaires entre les fragments. Grâce à sa flexibilité et sa réussite inhérentes, cette approche convient aux constructions d’ADN de petite et grande taille, comprend des inserts simples et multiples et a été utilisée pour construire des génomes entiers. Les produits résultants peuvent être utilisés pour un certain nombre d’applications en aval, notamment la transformation, la PCR et l’amplification en cercle roulant (RCA). Le kit de clonage EX de l’assemblage GeneArt Gibson, cellules chimiquement compétentes, est un kit complet qui inclut un master Mix, une cellule témoin positive, de l’eau et des bactéries E. coli One Shot TOP10 chimiquement compétentes.
Caractéristiques du kit de clonage EX de l’assemblage GeneArt Gibson :
- Simple : assemblez et clonez jusqu’à 15 fragments d’ADN en une seule réaction
- Efficace : sa grande efficacité garantit des clones efficaces pour les constructions simples ou difficiles
- Flexible : une conception qui permet un assemblage dans n’importe quel vecteur de votre choix
- Pratique—disponible sous forme de kits de Master Mix et de kits de clonage complets avec des cellules chimiques ou électrocompétentes
- Fiable—plus de 4000 citations dans la littérature scientifique soulignant sa grande efficacité
Assemblage de 15 fragments maximum
Le kit de clonage EX de l’assemblage GeneArt Gibson est un processus robuste, à un seul tube et en deux étapes grâce auquel jusqu’à 15 inserts et vecteurs sont combinés dans un mélange enzymatique exclusif pour assembler des fragments d’ADN avec une homologie des extrémités terminales partagée sans séquences supplémentaires ou cicatrices (transparent). Une fois que cette réaction doublement optimisée est terminée, une portion de la réaction d’assemblage est ensuite transformée en cellules chimiquement compétentes ou électrocompétentes, afin d’obtenir des clones prêts à être analysés le jour suivant. L’homologie des extrémités terminales de 20 à 40 paires de base requise est conçue dans le fragment de novo pour la synthèse ou peut être facilement conçue par amplification PCR avec des oligos d’ADN personnalisés. Ce mélange enzymatique spécial crée une construction d’ADN homogène et liée par covalence qui offre une grande efficacité.
Une méthode robuste pour une efficacité maximale
En raison du produit final lié par covalence, la méthode EX de l’assemblage GeneArt Gibson permet l’utilisation de cellules chimiquement compétentes ou de cellules électrocompétentes pour une efficacité de transformation optimale, particulièrement importante pour les constructions plus difficiles. Il n’est pas nécessaire d’utiliser des enzymes de restriction, une ligature ou des sites de recombinaison et la méthode garantit une construction parfaitement transparente sans bases supplémentaires indésirables.
Offre une grande polyvalence
La méthode EX de l’assemblage GeneArt Gibson garantit la polyvalence, permet de simplifier de nombreuses techniques grâce à la combinaison, l’ajout, la suppression ou l’échange rapide de segments d’ADN et élimine la nécessité de sous-cloner, ce qui permet de gagner du temps et des efforts dans le flux de travail lié au clonage.
