Fournit une stratégie de clonage très efficace, en 5 minutes et en une étape, (“clonage TOPO”) pour l’insertion directe de produits de PCR à extrémités franches, amplifiés avec des polymérases thermostables à activité corrective, dans un vecteur plasmidique.
Souche bactérienne ou de levures
TOP10
Résistance aux antibiotiques des bactéries
Kanamycine (KanR), Zeocin™ (ZeoR)
Type de cellule
Chimiquement compétent
Méthode de clonage
Blunt TOPO™
Contenu et stockage
Boîte 1 : •Vecteur PCR™ Blunt II-TOPO™ linéarisé et activé par topoisomérase I • Solution saline • dNTP • Modèle de contrôle • Amorces directes et inverses M13 • Eau stérile
Stockez entre -5 et -30°C. Tous les réactifs sont stables pendant 6 mois lorsqu’ils sont correctement stockés.
Boîte 2 : • Cellules d’E. coli chimiquement compétentes One Shot™ ou Electrocomp™ • Milieu S.O.C. • Plasmide de contrôle pUC19 superenroulé
Stockez entre -68 et -85°C.
Marque
Invitrogen
Points forts
Informations sur la commande
Conditions d’expédition : Glace carbonique
Caractéristiques principales
Chaque kit contient le vecteur Zero Blunt™ TOPO™ qui possède le gène ccdB comme sélecteur positif, autorisant seulement la croissance des vecteurs plasmide avec recombinants.
Disponible avec une variété de cellules compétentes, ou sans cellules compétentes
Rapide et facile — passez de la PCR aux clones en seulement 3 étapes, dont une réaction de clonage de 5 minutes
Efficace — obtenez jusqu’à 95 % de clones avec le bon insert
Éprouvé — offrent des performances fiables depuis plus d’une décennie avec plus de 20 000 citations
Simple — aucune ligase, procédure post-PCR ou amorce PCR contenant des séquences spécifiques n’est requise
Précision — pour une utilisation avec des polymérases d’ADN haute fidélité, pas besoin de dépassement A sur le produit PCR
Le vecteur pCR™ Blunt II-TOPO™ permet de cloner les produits de PCR à extrémités franches et générés par les polymérases thermostables à activité corrective comme l’ADN polymérase Platinum™ Pfx.
Il permet de sélectionner directement les recombinants grâce à la rupture du gène E. coli, ccdB létal. Le vecteur contient le gène ccdB fusionné à l’extrémité carboxylique du fragment LacZα. La ligature d’un produit de PCR à extrémités franches perturbe l’expression du gène de fusion LacZα-ccdB, permettant seulement la croissance des recombinants positifs après transformation. Les cellules contenant des vecteurs non recombinants sont éliminées durant l’étalement. Le screening bleu ou blanc n’est donc pas nécessaire.
Grâce à la technologie de clonage TOPO™, il n’est pas nécessaire d’utiliser des amorces PCR contenant des séquences spécifiques ou des procédures post-PCR, de préparer les vecteurs ni d’effectuer d’autres étapes de manipulation longues d’ADN. Il suffit d’ajouter votre réaction PCR directement dans le vecteur chargé en topoisomérase, d’incuber pendant 5 minutes et de transformer les cellules compétentes E. coli.
Les kits de clonage par PCR Zero Blunt™ TOPO™, pour l’insertion directe des produits de PCR à extrémités franches dans un vecteur de plasmide, peut s’acheter avec une variété de cellules compétentes qui offrent différents avantages
Caractéristiques techniques
Marque
Invitrogen
Réf. B-LABO
BL-RE-087186
Réf. fabricant
15375533
Souche bactérienne ou de levures
TOP10
Résistance aux antibiotiques des bactéries
Kanamycine (KanR), Zeocin™ (ZeoR)
Type de cellule
Chimiquement compétent
Méthode de clonage
Blunt TOPO™
Contenu et stockage
<b>Boîte 1 :</b><br>•Vecteur PCR™ Blunt II-TOPO™ linéarisé et activé par topoisomérase I<br>• Solution saline<br>• dNTP<br>• Modèle de contrôle<br>• Amorces directes et inverses M13<br>• Eau stérile<br><br> Stockez entre -5 et -30°C.<br>Tous les réactifs sont stables pendant 6 mois lorsqu’ils sont correctement stockés.<br><br><b>Boîte 2 :</b><br>• Cellules d’<i>E. coli</i> chimiquement compétentes One Shot™ ou Electrocomp™<br>• Milieu S.O.C.<br>• Plasmide de contrôle pUC19 superenroulé<br><br>Stockez entre -68 et -85°C.
Format
Kit
Gamme de produits
TOPO™
Type de produit
Kits de clonage PCR
Accélérateur
SP6
Quantité
10 réactions
Vecteur
Vecteurs de clonage TOPO
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