Le kit d’ADN de donneur Invitrogen TrueTag, GFP, fournit une solution rapide pour le marquage de gènes à haute efficacité (jusqu’à 100 % de cellules modifiées) avec de l’ADN de donneur prêt à la transfection pour les expériences de modification du génome. Les avantages des kits d’ADN de donneur TrueTag comprennent : • Amplification par PCR en une étape pour générer un modèle de donneur : aucun clonage requis • Générer des donneurs d’ADN prêts à la transfection en quelques heures plutôt qu’en plusieurs jours • Enrichir jusqu’à 100 % de cellules marquées au GFP Le kit d’ADN de donneur TrueTag, GFP, fournit tout ce dont vous avez besoin pour produire un donneur d’ADN de haute qualité pour marquer vos gènes avec un marqueur de sélection et un FP. Il suffit de fournir deux amorces spécifiques au locus pour ajouter des bras d’homologie, amplifier par PCR et purifier pour un donneur prêt à la transfection en quelques heures, et non plusieurs jours. Chaque kit est conçu pour vous permettre de : • Marquer l’extrémité carboxy-(C-) ou amino-(N-) de votre gène d’intérêt • Choisir les marqueurs de sélection de la puromycine ou de la blasticidine : selon ce qui convient le mieux au modèle cellulaire • Éliminer facilement les marqueurs de résistance aux antibiotiques avec du Cre / Lox après l’enrichissement cellulaire Le kit comprend • Quatre modèles de donneurs linéaires : Résistance à la N-terminale / puromycine, résistance à la N-terminale / blasticidine, résistance à la C-terminale / puromycine, résistance à la C-terminale / blasticidine • Master Mix PCR haute fidélité Phusion Flash • Colonnes et tampons de purification PCR • Amorces de contrôle positif pour marquer la bêta-actine humaine (ACTB) Logiciel intuitif permettant de concevoir rapidement des réactifs spécifiques aux gènes Les réactifs de modification de gènes spécifiques à la cible sont requis pour une bonne activation du marqueur fluorescent. Le logiciel Web Invitrogen TrueDesign Genome Editor a été spécialement conçu pour : 1. Identifier votre transcript de gène cible 2. Désigner votre site d’insertion 3. Concevoir et activer la commande facile de tous les composants nécessaires Réactifs requis disponibles via le logiciel TrueDesign (non inclus dans le kit) • L’ARN guide CRISPR ou les TALEN conçus à côté de l’extrémité N ou C-terminale • Oligos pour PCR : amplifiez votre donneur et ajoutez les bras d’homologie appropriés • Amorces de séquençage pour l’évaluation de l’efficacité du clivage CRISPR-Cas9 • Amorces de vérification pour valider l’insertion correcte du donneur d’ADN TrueTag Également requis et disponibles à l’achat séparément ou dans le cadre du flux de travaux TrueDesign : • Protéine v2 Cas9 TrueCut, protéine Cas9 TrueCut HiFi ou ARNm CRISPR GeneArt • Réactif de transfection CRISPRMAX ou réactif de transfection MessengerMAX
Caractéristiques techniques
| Marque | Invitrogen |
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| Réf. B-LABO | BL-RE-087314 |
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| Réf. fabricant | 17103209 |
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| Contenu et stockage | • Kit d’assemblage TrueTag, stocker à -20°C<br>• Kit de nettoyage TrueTag, stocker à température ambiante<br><br> |
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| Format | Kit |
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| À utiliser avec (application) | Marquage des gènes fluorescents, développement de lignées cellulaires |
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| Marqueur ou colorant | GFP |
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| Nbre de réactions | 10 réactions |
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| Gamme de produits | TrueTag™ |
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| Type de produit | Kit d’ADN du donneur |
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| Conditions d’expédition | Homologué pour expédition sur de la glace ou de la glace carbonique |
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